
環氧(Oxygen)乙烷壓力蒸汽滅菌(fungus)(Sterilization)器滅菌試驗操作控制程序
(1) 根據試驗要求,制備枯草桿菌(fungus)黑色變種芽孢懸液和菌片。菌片放入雙層聚乙烯塑料袋內密封包裝,每袋 2 片。每次試驗用 20 袋。
(2) 將滅菌器上、中、下 3 層,每層內、中、外各設一點,共設 9 點。壓力蒸汽滅菌器具有造型新穎美觀、結構合理、功能齊全、加熱迅速、滅菌*等優點。適用于醫療、科研、食品、等單位對手術器械、敷料、玻璃器皿、橡膠制品、食品、藥液、培養基等物品進行滅菌。生物安全柜是為操作原代培養物、菌毒株以及診斷性標本等具有感染性的實驗材料時,用來保護操作者本人、實驗室環境以及實驗材料,使其避免暴露于上述操作過程中可能產生的感染性氣溶膠和濺出物而設計的。每點物品(article)中間布放1 袋,共需 18 袋試驗菌片。另將一袋(2 片)菌片放置在室溫條件(tiáo jiàn)下作為陽性對照。
(3)按使用(use)說明書所規定(guī dìng)的環氧(Oxygen)乙烷濃度、作用時間、柜內(Cabinet)的溫度和相對濕度(shī dù),在滿載條件(tiáo jiàn)下進行環氧乙烷滅菌(fungus)處理。滿載用物品(article),隨滅菌器用途而定。處理完畢,取出菌片,分別移種于 5 ML 營養(nutrition)肉湯培養基中,置 37℃ 培養箱內培養,7 D后觀察**終結果(定性培養檢測)。
對難以判斷結果(result)的營養(nutrition)肉湯管,取其中 0.2ML 懸液接種營養瓊脂平板, 用無菌(fungus)L 棒涂抹均勻(jūn yún), 置 37℃ 培養箱內培養。生物安全柜是為操作原代培養物、菌毒株以及診斷性標本等具有感染性的實驗材料時,用來保護操作者本人、實驗室環境以及實驗材料,使其避免暴露于上述操作過程中可能產生的感染性氣溶膠和濺出物而設計的。48H后涂片染色,顯微鏡下觀察菌落形態(pattern),或進一步做其他試驗,判斷有無生長(Grow)或生長的是否為試驗菌。若為非試驗菌,則應重新進行試驗。
(4) 測試中,應同時設立定性和定量陽性對照組(菌片對照)與陰性對照組(培養基對照)。
(5) 定量陽性對照組,以同批試驗用菌(fungus)片置室溫下,待消毒(disinfection)或滅菌試驗組達規定作用時間后,立即將該菌片 2 片分別放入含 5.0ML PBS 試管中,各振敲 80 下。取洗液進行活菌培養計數。
(6) 定性陽性對照組,以同批試驗用菌(fungus)片置室溫下,待滅菌試驗組達規定(guī dìng)作用時間后,立即將該菌片 2 片,分別接種于 5.0ML 營養(nutrition)肉湯培養基,放入溫箱中作定性培養,觀察有細菌生長情況。
(7) 陰性對照組,以同批次試驗用未染菌(fungus)樣片 2 片,分別接種于 5.0ML營養(nutrition)肉湯培養基,同時將未接種過的營養肉湯培養基放入培養箱中作定性培養,觀察有無細菌生長。
(8) 試驗重復 5 次。
(9)在5次試驗中,每次試驗中的陽性對照菌(fungus)片,回收菌量均應在5×`10^5`CFU/片~5×`10^6`CFU/片;定性陽性對照組,細菌生長良好;陰性對照應無菌生長。陽性或陰性對照若有不符合上述要求的結果,試驗作廢,重新進行。