紫外可見分光光度計采用一個可以產生多個波長的光源，通過系列分光裝置，從而產生特定波長的光源，光源透過測試的樣品后，部分光源被吸收，計算樣品的吸光值，從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
紫外可見分光光度計的光譜分布范圍：
包括波長范圍為400~760nm的可見光區和波長范圍為200～400nm的紫外光區，不同的光源都有其的發射光譜，因此可采用不同的發光體作為儀器的光源。
鎢燈的發射光譜：鎢燈光源所發出的400～760nm波長的光譜，光通過三棱鏡折射后，可得到由紅,橙,黃,綠,藍,靛,紫組成的連續色譜；該色譜可作為可見光分光光度計的光源。
氫燈(或氘燈)的發射光譜：氫燈能發出185～400nm波長的光譜,可作為紫外光光度計的光源。
物質的吸收光譜
(1)如果在光源和棱鏡之間放上某種物質的溶液，此時在屏上所顯示的光譜已不再是光源的光譜，它出現了幾條暗線，即光源發射光譜中某些波長的光因溶液吸收而消失，這種被溶液吸收后的光譜稱為該溶液的吸收光譜，不同物質的吸收光譜是不同的，因此根據吸收光譜可以鑒別溶液中所含的物質物質的吸收光譜。
(2)當光線通過某種物質的溶液時，透過的光的強度減弱，因為有一部分光在溶液的表面反射或分散，一部分光被組成此溶液的物質所吸收，只有一部分光可透過溶液，入射光=反射光 分散光 吸收光 透過光如果我們用蒸餾水(或組成此溶液的溶劑)作為"空白"去校正反射，分散等因素造成的入射光的損失，則:入射光=吸收光十透過光。
