一、輸液系統故障（高頻，影響流動相輸送）
1. 壓力異常（壓力過高 / 過低 / 波動）
故障現象 | 可能原因 | 排查與解決步驟 |
壓力突然升高（超過正常范圍 50% 以上） | 1. 色譜柱堵塞（流動相污染、樣品殘留）；2. 管路堵塞（過濾白頭堵塞、單向閥污染）；3. 流動相粘度大（如高比例乙腈 / 緩沖鹽低溫下） | 1. 斷開色譜柱，用兩通替代，若壓力恢復正常→柱子堵塞，需用合適溶劑反向沖洗（如反相柱用甲醇 - 水梯度沖洗）；2. 若壓力仍高→檢查管路：拆過濾白頭（入口單向閥處），用甲醇超聲清洗，或更換新白頭；3. 冬季可將流動相恒溫至 25℃，降低粘度。 |
壓力過低（接近 0 或無壓力） | 1. 流動相不足（溶劑瓶空、管路進氣）；2. 單向閥泄漏（密封圈老化、有氣泡）；3. 泵頭密封墊磨損 | 1. 檢查溶劑瓶液位，若管路進氣→打開排液閥，用 “Purge" 功能沖洗泵頭，排出氣泡；2. 拆下單向閥，用甲醇超聲 10 分鐘（避免用超聲清洗密封圈），晾干后重裝；3. 若仍泄漏→更換泵頭密封墊（安捷倫配件號如 G1311-68701）。 |
壓力波動（忽高忽低） | 1. 流動相中有氣泡（混合溶劑脫氣不充分）；2. 單向閥污染；3. 比例閥故障（梯度洗脫時） | 1. 開啟在線脫氣機（若有），或手動搖晃流動相瓶排氣后超聲脫氣；2. 按 “壓力過低" 步驟清洗單向閥；3. 梯度模式下，切換至等度模式測試，若波動消失→比例閥需校準（用安捷倫 ChemStation 軟件執行 “比例閥校準"）。 |
2. 流動相輸送異常（漏液 / 梯度偏差）
漏液位置與解決：
溶劑瓶接口漏液：管路接頭松動→重新擰緊；接頭老化→更換 PEEK 接頭（避免過緊導致開裂）。
泵頭漏液：密封墊磨損→更換密封墊；排液閥未關緊→順時針擰緊排液閥旋鈕（勿過度用力）。
柱溫箱內漏液：色譜柱接頭松動→用扳手輕輕擰緊（反相柱常用 10-15N?m 扭矩）；柱子兩端篩板破損→更換色譜柱篩板。
梯度偏差（保留時間漂移）：
原因：比例閥污染、流動相混合不均；
解決：用異丙醇沖洗比例閥（執行 “比例閥沖洗" 程序），混合溶劑需提前手動搖勻后再倒入溶劑瓶。
二、進樣系統故障（影響進樣準確性）
1. 進樣針相關問題
故障現象 | 可能原因 | 解決步驟 |
進樣針堵塞（無法吸液 / 推液） | 1. 樣品中有顆粒物（未過濾）；2. 樣品殘留（如蛋白、強極性物質） | 1. 用 50% 甲醇 - 水超聲清洗進樣針（超聲時間≤5 分鐘，避免損壞針芯）；2. 若堵塞嚴重→用細鋼絲通針（安捷倫專用通針工具，勿用普通鋼絲劃傷針內壁）；3. 后續樣品需經 0.22μm 濾膜過濾。 |
進樣針漏液（吸液后滴液） | 1. 針芯磨損；2. 進樣針與進樣閥接口不匹配（如用錯規格針） | 1. 更換進樣針（安捷倫 1260 進樣針常用型號如 G1329-20530）；2. 確認進樣針規格：手動進樣閥用 25μL/100μL 針，自動進樣器需匹配對應型號（如 1290 自動進樣器用 G4226-68700）。 |
2. 自動進樣器故障
進樣后無峰 / 峰面積變小：
原因：進樣閥轉子污染、進樣量設置錯誤；
解決：拆開進樣閥轉子，用甲醇超聲清洗（轉子材質為 PEEK，避免接觸強酸堿）；檢查軟件中 “進樣量" 參數是否與方法一致（如誤設為 1μL 而非 10μL）。
進樣器卡針（機械臂不動）：
原因：進樣針未放回正確位置、機械臂軌道有異物；
解決：手動將進樣針放回針座，清除軌道上的灰塵 / 廢液，重啟自動進樣器（關閉電源后 30 秒再開機）。
三、檢測系統故障（影響信號采集）
1. 紫外檢測器（UV/VWD）常見問題
故障現象 | 可能原因 | 解決步驟 |
基線漂移（緩慢上升 / 下降） | 1. 流動相未平衡（新換流動相后）；2. 檢測器燈能量不足（壽命到期）；3. 流通池污染 | 1. 讓流動相持續沖洗系統（通常需 30-60 分鐘，基線漂移≤0.01mAU/h 為正常）；2. 查看燈能量：在 ChemStation 軟件中 “檢測器→燈能量"，若能量低于初始值 50%→更換氘燈（安捷倫氘燈型號如 G1314-60100）；3. 清洗流通池：用 10% 硝酸 - 水、甲醇依次沖洗， each 溶劑沖洗 10 分鐘。 |
基線噪音大（雜峰多） | 1. 流動相污染（溶劑純度不夠，如用 AR 級替代 HPLC 級）；2. 流通池有氣泡；3. 電源干擾（如靠近離心機） | 1. 更換 HPLC 級溶劑，新流動相需超聲脫氣 20 分鐘；2. 打開檢測器排液閥，用注射器從流通池出口抽氣，或執行 “流通池排氣" 程序；3. 將儀器遠離強電磁干擾設備，檢查電源接地是否良好。 |
無信號輸出（基線為 0） | 1. 檢測器未開啟（燈未點亮）；2. 信號線纜松動（檢測器與工作站連接）；3. 流通池堵塞（無流動相通過） | 1. 在軟件中開啟檢測器燈（“檢測器→燈控制→開啟"）；2. 檢查檢測器背面信號線纜，重新插拔并擰緊；3. 斷開流通池入口管路，用注射器推液，若推不動→清洗流通池（同 “基線漂移" 步驟）。 |
2. 示差折光檢測器（RID）故障
基線不穩定（波動大）：
原因：柱溫 / 檢測池溫波動（溫差＞0.1℃）、流動相折射率變化；
解決：確保柱溫箱與 RID 檢測池溫度一致（如均設為 30℃），流動相需一次性配制足量，避免分次配制導致折射率差異。
四、柱系統故障（影響分離效果）
1. 色譜峰異常（峰形差 / 保留時間漂移）
故障現象 | 可能原因 | 解決步驟 |
峰拖尾（拖尾因子＞1.5） | 1. 色譜柱柱頭污染（樣品殘留）；2. 流動相 pH 不合適（如堿性樣品用酸性流動相）；3. 柱子老化（柱效下降） | 1. 反向沖洗色譜柱（如反相柱用甲醇 - 乙腈 - 甲醇梯度沖洗，流速 1mL/min，沖洗 30 柱體積）；2. 調整流動相 pH：堿性樣品添加 0.1% 三乙胺，酸性樣品添加 0.1% 磷酸；3. 若柱效下降＞30%→更換新色譜柱。 |
峰分裂（單峰變雙峰） | 1. 進樣量過大（超過柱子容量）；2. 柱子柱頭塌陷（填料流失）；3. 樣品溶劑與流動相不兼容（如用純甲醇溶解樣品，流動相為水 - 乙腈） | 1. 減少進樣量（如從 20μL 減至 10μL）；2. 檢查柱子柱頭：若填料凹陷→更換柱頭篩板或報廢柱子；3. 更換樣品溶劑，使其與流動相比例一致（如用 50% 水 - 50% 乙腈溶解樣品）。 |
保留時間漂移（每次進樣相差＞2%） | 1. 流動相比例變化（溶劑揮發，如甲醇易揮發）；2. 柱溫波動；3. 柱子平衡不充分 | 1. 密封溶劑瓶（用帶透氣膜的瓶蓋），每天更換新鮮流動相；2. 檢查柱溫箱溫度是否穩定（波動≤0.5℃）；3. 新柱子或長時間未用的柱子，需用流動相沖洗 60 分鐘以上再進樣。 |
2. 色譜柱堵塞（壓力高 + 峰面積變小）
解決：用 “低流速反向沖洗"：反相柱用甲醇 - 水（90:10），流速 0.2mL/min，沖洗 12 小時；正相柱用正己烷 - 異丙醇（90:10），避免用含水溶劑。
五、日常維護要點（減少故障概率）
流動相管理：
僅用 HPLC 級溶劑，緩沖鹽（如磷酸二氫鉀）需用超純水配制，配制后 24 小時內使用（避免微生物滋生）。
每天實驗結束后，用 10% 甲醇 - 水沖洗系統 30 分鐘（反相柱），正相柱用正己烷沖洗，防止鹽結晶或樣品殘留。
部件定期更換：
泵頭密封墊：每 3000 小時更換一次；
氘燈：每 2000 小時或能量不足時更換；
過濾白頭：每 1000 小時或壓力升高時更換。
軟件維護：
每周執行一次 “系統性能測試"（如測試柱效、壓力穩定性）；
每月備份方法文件和數據，避免軟件崩潰導致數據丟失。
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